作物磷素的测定方法
一、磷素营养作用
磷是构成作物细胞中核蛋白、核酸、磷脂和许多酶的重要成分,在分生组织和生长旺盛部位含磷量都较丰富。磷的主要作用是促进细胞分裂和生长,以促进光合作用和呼吸作用,加强蛋白质、脂肪和糖的代谢。施磷后,作物根系发达,分蘖力强,可增加有效穗粒数,促进子实饱满,并提早成熟,磷还具有提高作物的抗旱、抗寒、抗热风及抗病虫害等能力。
作物苗期对磷反应*敏感,所以磷肥*适合做底肥。
二、全磷的测定(钒钼黄比色或钼锑抗比色)
1.仪器 君翰UV-1200型分光光度计。
2.试剂
(1)钒钼酸试剂 将12.5克钼酸铵[(NH4)6MO7O24·4H2O]溶于200毫升水中,0.625克偏钒酸铵[NH4VO3]溶于150毫升沸水中,冷却后加入125毫升浓硝酸,再冷却至室温,将钼酸铵溶液边搅拌边缓慢注入偏钒酸铵溶液中,用水稀释定容至500毫升。
(2)6摩/升氢氧化钠溶液24克氢氧化钠溶于水稀释至100毫升。
(3)2,6—二硝基酚指示剂0.25克2,6—二硝基酚溶于100毫升水中。
(4)50毫克/千克磷标准溶液 准确称取105℃烘干的磷酸二氢钾0.2195克,溶于水加浓硫酸5毫升定容至1升容量瓶中。
3. 分析步骤 吸取待测液20毫升于50毫升容量瓶中,加2滴2,6—二硝基酚指示剂,用6摩/升氢氧化钠中和至刚呈黄色,准确加入10毫升钒钼酸铵试剂,定容摇匀,放置15分后在波长450纳米处比色。
标准曲线的绘制:吸取50毫克/千克的磷标准液0毫升、5毫升分别置于50毫升容量瓶中,按上述步骤显色,即得0毫克/千克、5毫克/千克的磷标准溶液,15分后,在波长450纳米处用空白液调透过率100%,消光值为零,标准溶液浓度显示值为0000、0500,同时记下待测液浓度显示值。
4.结果计算
全磷(%)=待测液浓度显示值×显色液体积×分取倍效×100式中:待测液浓度显示值——仪器测得的浓度值(毫克/千克);
显色液体积——50毫升;
分取倍数——消煮液定容体积100毫升/测定时吸取的消煮液体积20毫升;
m——样品质量(克)。
三、全磷的速测
1. 仪器 君翰JH-PN02植物营养测定仪
2. 试剂 君翰植物营养测定仪配套试剂
3. 操作步骤
用吸管分别吸取蒸馏水2mL(做空白用)、作物标准液2mL(做标准用)、100倍稀释液2mL(做待测用)于三个小玻璃瓶中依次加入:
作物磷1号试剂4滴(缓慢小心,摇匀至无气泡),
作物磷2号试剂4滴,摇匀至无气泡,
作物磷3号试剂1滴,摇匀。
摇匀,静置10分钟后分别转移到三个比色皿中,上机测定:
①拨动滤光片左轮使数值置6,置空白液于光路中,按“模式”键,功能号切换至1,按“调整+”键,仪器显示≤100%;按“调整-”键,使仪器显示100%。
②按“模式”键,功能号切换至3,将标准液置于光路中,按调整键,使仪器显示值为105.0。
③再将待测液置于光路中,此时仪器读数即为作物磷素(P)B含量(μg/mL)。