作物氮的测定方法

方法要点：样品在浓硫酸溶液中，脱水、碳化、氧化等一系列反应，氧化剂双氧水在硫酸溶液中分解成新生态的氧，具有强烈的氧化作用，分解硫酸没有破坏的有机物和碳，变成二氧化碳和水(植物中的氮、磷大多部分以有机态存在，钾是以离子态存在)使有机氮、磷转化为主要铵盐和磷酸盐。可在同一消煮液中分别测定氮、磷、钾。

样品的处理：称取烘干的植物样品0.5000克，置于50毫升的开氏瓶中，用少量水冲洗瓶颈上的样品，然后加浓硫酸8毫升轻轻摇匀(*好放置过夜),瓶口放一短颈小漏斗，在电炉上小火消煮，待硫酸开始分解冒白烟时，提高消煮温度，当溶液全部呈棕黑色时取下，加10滴双氧水(要直接加入开氏瓶底部)再加热至微沸2~5分，取下，稍冷后再加双氧水10滴重复3次(每次添加的双氧水应逐渐减少，从开始加双氧水到结束共2毫升左右)到溶液呈无色或透亮后，再加热5~10分，以除尽剩余的双氧水，取下冷却。用少量水冲洗开氏瓶，将消煮液转移到100毫升容量瓶中，定容摇匀，干过滤，滤液承接到干燥的三角瓶中，供测氮、磷、钾，同时进行消煮空白试验。

(一)氮的测定

1.仪器 君翰锐仪JH-V1020型分光光度计。

2.试剂

(1)10%酒石酸钾钠溶液 溶解100克酒石酸钾钠于蒸馏水中，定容1升。

(2)10%氢氧化钾溶液 溶解10克氢氧化钾于蒸馏水中，定容至100毫升。

(3)奈氏试剂溶解45克碘化汞和35克碘化钾，将此溶液溶于少量水中，加112克氢氧化钾，加水800毫升，冷却后移入1升的容量瓶中，稀释至刻度摇匀，放置数日后，将上部澄清液吸入棕色瓶中备用。

(4)100毫克/千克氮标准溶液 称取0.3817克氯化铵定容至1升。

(5)5毫克/千克氮标准液 抽取100毫克/千克氮标准液5毫升定容至100毫升。

3. 分析步骤

吸取空白消煮液2毫升、5毫克/千克氮标准液10毫升、硫酸一双氧水待测消煮液2毫升分别置于50毫升容量瓶中，加2毫升10%酒石酸钾钠溶液摇匀，再加10%氢氧化钾溶液中和，加水稀释至约40毫升，加2.5毫升奈氏试剂，加水至刻度摇匀，此空白消煮液和氮标准液的浓度分别为0毫克/千克和1毫克/千克，30分后在君翰锐仪JH-V1020型分光光度计410纳米波长处进行比色。

用空白消煮液调仪器透过率100%,消光值为零，标准液的浓度显示值为0100,记下待测液浓度显示值(毫克/千克)。

4.结果计算

全氮(%)=[待测液浓度显示值×显色液体积×分取倍数]/m×10⁶×100式中：待测液浓度显示值——仪器测得的浓度值(毫克/千克);

显色液体积——50毫升；

分取倍数——消煮定容体积100毫升/测定时吸取的消煮液体积2毫升；

m——样品质量(克)。

(二) 氮的速测

1.仪器 君翰锐仪作物营养测定仪JH-PN02。

2.试剂 作物营养测定仪配套试剂一套

3.步骤 用吸管分别吸取蒸馏水2mL(做空白用)、作物标准液2mL(做标准用)、100倍稀释液2mL(做待测用)于三个小玻璃瓶中依次加入：

作物硝态氮1号试剂2滴（逐渐加入并摇动）

作物硝态氮2号试剂4滴

作物硝态氮3号试剂1滴（使用前剧烈摇动或70℃左右热水水浴3分钟后摇动几下，使沉积物充分悬浮后加用）

振荡一分钟，静置15分钟后分别转移到三支比色皿中，上机测定。

①拨动滤光片左轮使数值置2，置空白液于光路中，按“模式”键，功能号切换至1，按“调整＋”键，仪器显示≤100％；按“调整－”键，使仪器显示100％。

②按“模式”键，功能号切换至3，将标准液置于光路中，按调整键，使仪器显示值为240.0。

③再将待测液置于光路中，此时仪器读数即为作物中硝态氮含量（μg/mL ）。

具体操作视频可联系君翰科学仪器获取。