淀粉的测定方法【君翰锐仪】

谷物中淀粉的测定

(一)方法要点

淀粉在稀酸的作用下，可以水解为糊精和麦芽糖，*后全部转化为葡萄糖，再测定葡萄糖，推算出淀粉的含量。

(二)仪器

电热烘干箱。

(三)试剂

1.1%盐酸水溶液 量取23毫升浓盐酸加水至1升。

2.10%氢氧化钠溶液10克氢氧化钠定容至100毫升。

3.10%中性醋酸铅溶液 称取100克醋酸铅溶解在水中定容至1升，用中速定量滤纸过滤。

4.甲基红指示剂 称取0.5克甲基红溶解在100毫升水中。

5.0.1%碘—碘化钾溶液 称取2克碘化钾、1克碘溶解在少量水中，定容至1升，储存在棕色瓶中。

6.斐林试剂A称取34.64克五水硫酸铜溶解在少量水中，定容至500毫升容量瓶中，摇匀。

7.斐林试剂B称取173克酒石酸钾钠和50克氢氧化钠溶于200毫升水中定容至500毫升，摇匀。

8.0.5%亚甲基蓝指示剂 称取0.5克亚甲基蓝溶于100毫升水中。

9.葡萄糖标准溶液  称取已干燥的葡萄糖(一级)0.2000克，用少量水溶解后定容至100毫升，此为2毫克/毫升标准葡萄糖溶液。

10.硫酸钠饱和溶液

(四)分析步骤

1.水解 称取风干磨细通过60目筛的样品0.5000克放入300毫升具塞的三角瓶中，加入1%盐酸水溶液150毫升，塞紧塞子，放在105℃烘箱中加热水解，在水解过程中要不断摇动三角瓶，4小时后取出，用玻璃棒取出少许带固体的悬浮液，放在白瓷板上，加1滴0.1%碘—碘化钾溶液，如固体不显蓝色，红色或紫色，说明水解完全，所取试样须无损倒回三角瓶中，洗净，洗液全部收集在原三角瓶中。如水解不完全，继续加热30分后再检查，直到水解完全。

水解结束后，冷至室温，加入甲基红指示剂3滴，用10%氢氧化钠中和溶液至微黄色，不可过量，然后再逐滴加入中性10%醋酸铅溶液5～10毫升，以沉淀蛋白质，静置片刻，待上部溶液澄清后，再加入几滴醋酸铅溶液，检查蛋白质是否沉淀完全。继续滴加醋酸铅溶液直至无白色絮状的蛋白质沉淀产生为止(絮状沉淀与其他沉淀分清)。

将水解液用中速定量滤纸过滤于250毫升容量瓶中，用水洗涤烧瓶和沉淀数次，定容至刻度，摇匀。

用吸管准确吸取50毫升清液于100毫升容量瓶中，逐滴加入5～7毫升饱和硫酸钠溶液以除去过量的醋酸铅至不再产生白色硫酸铅沉淀为止，加水定容后过滤，即得由淀粉水解而得到的葡萄糖溶液。

2.滴定

(1)斐林试剂的标定

1)吸取斐林试剂A、斐林试剂B各5毫升于250毫升三角瓶中，用滴定管放入10毫升葡萄糖标准溶液，在酒精灯上加热至沸，加亚甲基蓝指示剂5滴，在沸腾的条件下继续用葡萄糖标准溶液滴定溶液中的蓝色消失为终点。记下全部葡萄糖标准溶液用量V₁。

2)吸取斐林试剂A、斐林试剂B各5毫升，放于250毫升三角瓶中，再由滴定管放入葡萄糖标准溶液V₁-1毫升，然后加热煮沸2分，加入亚甲基蓝指示剂5滴，在沸腾条件下继续用葡萄糖标准溶液滴至蓝色消失即为终点，记下消耗葡萄糖标准溶液的体积V₀。从沸腾开始到滴定完毕必须3分完成。

(2)样品的测定

1)吸取斐林试剂A、斐林试剂B各5毫升于250毫升三角瓶中，用滴定管放入100毫升样品葡萄糖溶液，在酒精灯上加热至沸，加亚甲基蓝指示剂5滴，在沸腾的条件下，继续用样品葡萄糖溶液滴定至蓝色消失即为终点，记下消耗样品葡萄糖溶液的体积V₂。

2)准确吸取斐林试剂A、斐林试剂B各5毫升于250毫升三角瓶中，再由滴定管放入V₂-1毫升样品葡萄糖溶液，然后加热煮沸2分，加入亚甲基蓝指示剂5滴，在沸腾下继续用样品葡萄糖溶液滴至蓝色消失即为终点，记下消耗样品葡萄糖溶液的体积V，从沸腾开始到滴定完毕必须在3分内完成。

(五)结果计算

淀粉(%)=糖标准浴液浓度5(毫克/毫升)×V₀×0.9×100/(m×50×250×V/100)

式中：0.9——葡萄糖换算为淀粉的系数(162.1/180.1=0.9);

m——样品的质量(克)。